Polymerase Chain Reaction

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麻煩的基因選殖步驟,在往常始終造成科學家們時間上的浪費。但是因為利用研究DNA複製過程的發現,加上互補鹼基配對原理,產生了

一項技術—聚合酶連鎖反應(The Basic Polymerase Chain Reaction),利用PCR這項技術可以輕易的將我們想要的那段DNA,複製出千

千萬萬份,以節省下很多時間。


聚合酶連鎖反應(The Basic Polymerase Chain Reaction)最基本的概念就是DNA的複製過程以及互補鹼基配對。當DNA要複製時,initiator protein

會與DNA複製起點結合以扭開雙股螺旋,使其他與複製有關的蛋白質也能與DNA結合。接著一小段核苷酸稱為primer(通常是一段RNA)會附著在複製起點。

有了primer,DNA polymerase就能附上來,開始複製DNA。細胞中游離的核苷酸在DNA polymerase的幫助下會依互補鹼基配對原理(A配T,C配G)和單股

DNA序列一一配對。每配上一個,DNA polymerase就往下移一位,一再重複此過程,便產生了一條雙股DNA,一股是新的,一股是舊的。
而執行PCR時,藉由機器來調控溫度以控制DNA雙股的開合,又分成三個階段。第一階段:Denaturation,加熱至94°C以打開DNA雙股螺旋。

第二階段:Annealing,溫度下降至55°C讓primer與單股複製起點附著。第三階段:Polymerization,溫度上升至72°C讓DNA polymerase和核苷酸



核苷酸、以及primer,接著不斷重複「加熱、冷卻、聚合」,想要的片段即會被大量生產。