儀器好好玩,原來是這樣!
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+ | : TLC是一種快速的分析技術,尤其是在化學合成實驗時,要測試反應是否結束,以及使用管柱層析時,須立即知道產物是否已經出來了,相較於其他價格昂貴且操作人員需要事前訓練的層析儀器,TLC能夠讓研究者迅速獲得解答,是很初步的分析方式,但對化學研究者而言,實際結構的鑑定仍需要其他分析技術的協助。小小的TLC片要點的漂亮,跑片跑直且分得開,需要很多小技巧,包括溶液的濃度、移動相極性、點跟點之的距離、點的大小、放入移動相的角度等,各種因素都會影響到跑片的結果,進而影響實驗的進行,但無須太過擔心操作不慎,熟能生巧,這些問題都能透過練習而改善。 | ||
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+ | : HPLC是應用非常廣的分析方法,如今的發展出的固定相與移動相變化萬千,因而能夠分離各式各樣的化合物,移動相可使用等位或梯度兩種沖提方式,等位沖提是保持相同的condition;而梯度充提則可以改變移動相組成、沖提速率、溫度等,藉此加快或改善分離的效率,使用具有光學活性固定相的管柱,甚至能分離出結構相同但具有不同光學活性的化合物。 | ||
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+ | : CE的基本原理為以高電壓作為驅動力,使樣本在具有一定電場的毛細管中依據不同的電泳移動率(electrophoretic mobility)而達到分離的效果,因為擁有較快速的分析時間、高分離效率、自動化、操作容易及溶劑與樣品量消耗量少等優勢,近年來成為分析臨床檢體的利工具之一,且分析對象涵蓋小分子如有機樣品至大分子如DNA及蛋白質等,應用相當廣泛。 | ||
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+ | : 流式細胞分析儀(Flow Cytometry),俗稱流式細胞儀。使用於細胞分類與分析的一種儀器,可以概略的分為三個部分,分別是流體、光學與電子系統的部分。在分析部分藉由流體動態使細胞依序排列單獨呈現,並使用雷射激發光源作為分析能源,藉由散射光與螢光獲得細胞大小與顆粒性等數據,藉由數據交叉比對,測定特定的細胞功能,若使用特定抗體可以達到細胞分類的目的。 | ||
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+ | ==三、 心得感想== |
在2015年11月13日 (五) 17:58所做的修訂版本
一、 作者簡介
Douglas A. Skoog 任教於 Standford Univetsity
F. James Holler任教於University of Kentucky
Stanley R. Crouch任教於Michigan State University
二、 本書摘要
- 本書介紹多種儀器分析方式,在這個月的讀書會裡我們著重在色層分析與毛細管電泳兩大類的分析技術,色層層析是一個極為重要的分析技術,依照固定相種類可分為液相層析(Liquid chromatography)與固相層析(Solid chromatography),薄層層析(Thin layer chromatography, TLC)與高效能液相層析(High performance liquid chromatography, HPLC)皆屬於常用的液相層析方法,毛細管電泳(Capillary electrophoresis, CE)則是更為新穎的分析方式,我們在摘要中將一一介紹這些絕妙的分析儀器與技術。
- TLC是一種快速的分析技術,尤其是在化學合成實驗時,要測試反應是否結束,以及使用管柱層析時,須立即知道產物是否已經出來了,相較於其他價格昂貴且操作人員需要事前訓練的層析儀器,TLC能夠讓研究者迅速獲得解答,是很初步的分析方式,但對化學研究者而言,實際結構的鑑定仍需要其他分析技術的協助。小小的TLC片要點的漂亮,跑片跑直且分得開,需要很多小技巧,包括溶液的濃度、移動相極性、點跟點之的距離、點的大小、放入移動相的角度等,各種因素都會影響到跑片的結果,進而影響實驗的進行,但無須太過擔心操作不慎,熟能生巧,這些問題都能透過練習而改善。
- HPLC是應用非常廣的分析方法,如今的發展出的固定相與移動相變化萬千,因而能夠分離各式各樣的化合物,移動相可使用等位或梯度兩種沖提方式,等位沖提是保持相同的condition;而梯度充提則可以改變移動相組成、沖提速率、溫度等,藉此加快或改善分離的效率,使用具有光學活性固定相的管柱,甚至能分離出結構相同但具有不同光學活性的化合物。
- CE的基本原理為以高電壓作為驅動力,使樣本在具有一定電場的毛細管中依據不同的電泳移動率(electrophoretic mobility)而達到分離的效果,因為擁有較快速的分析時間、高分離效率、自動化、操作容易及溶劑與樣品量消耗量少等優勢,近年來成為分析臨床檢體的利工具之一,且分析對象涵蓋小分子如有機樣品至大分子如DNA及蛋白質等,應用相當廣泛。
- 流式細胞分析儀(Flow Cytometry),俗稱流式細胞儀。使用於細胞分類與分析的一種儀器,可以概略的分為三個部分,分別是流體、光學與電子系統的部分。在分析部分藉由流體動態使細胞依序排列單獨呈現,並使用雷射激發光源作為分析能源,藉由散射光與螢光獲得細胞大小與顆粒性等數據,藉由數據交叉比對,測定特定的細胞功能,若使用特定抗體可以達到細胞分類的目的。