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在2008年6月10日 (二) 21:34所做的修訂版本

目錄 1 藥物分析讀書會 1.1 1.兔子血漿中的Ranitidine(RAN) 1.1.1 CYP： 1.1.2 2.Diazepam and血漿中的主要代謝物

藥物分析讀書會

1.兔子血漿中的Ranitidine(RAN)

Ranitide是一種抗胃酸的藥，主要是抑制胃壁細胞中所分泌H2-受體的抑制劑。同時此類藥物並不會抑制肝中Cytochrome P450酵素，因為它的同類藥物Cimetidine會抑制肝中CYP450，而使得產生毒素。療效：十二指腸潰瘍

CYP：

在人體內會與藥物代謝關係最密切的一群酵素，Cytochrome P450系統(CYP 450)。CYP 450酵素主要分佈在肝臟及小腸壁。其扮演的角色就是負責許多藥物、致癌物、食品添加物、環境污染物的代謝反應。也就是說酵素過多或許藥效就因此減弱(因有效成分被過度代謝掉，而排出體外); 反之如果酵素過低, 甚至缺乏則有可能毒性增加(因為藥物血中濃度過高)。所以任何會影響這個代謝酵素系統的藥物或食物即會影響經由此系統代謝的藥物，就是所謂的交互作用。所以沒有所謂的酵素較少就較好。

此次實驗主要是利用dansyl chloride衍生，因為它會和RAN的氨基產生反應，產生adducts。同時我們也很常看到dansyl chloride用在生化方面胺基酸的定序等等。

而我們要做的就是利用液液萃取方式抽出我們想要的東西。並且把偵測器設定在我們想要的波長。接著開始於血漿加入1M NaOH，用diethyl ether 萃取之。然而這個實驗的IS為Ephedrine HCl (EPH-HCl) 。RAN和EPH衍生後，接著在PH9.5的sodium bicarbonate 溶液中加熱至60度達10分鐘。此溶液的移動相為百分之48的acetonitrile和百分之52的sodium acetate solution (0.02 M, pH 4.6)

此實驗的濃度範圍：0.025-10μg/ml 回收率：97.5±1.1%

此方法回收率、精準度、穩定性都很高，但是就是分離時間過長，以及實驗步驟太過冗長、是非常需要好好的改善以及具有繼續研究的價值。

2.Diazepam and血漿中的主要代謝物

Diazepam是benzodiazepine的一種，一般使用作為安眠藥、抗焦慮藥和肌肉鬆弛劑，化學式C16H13ClN2O，可口服、靜脈注射、肌肉注射、或以栓劑方式給藥，在口服後，迅速被身體吸收，藥效很快開始，以靜脈注射或肌肉注射方式給藥的話，藥效更快。

三種主要活躍代謝產物N-desmethyldiazepam or nordiazepam(NDZ), oxazepam (OX) and temazepam (TZ)，由肝臟cytochrome P450s代謝，因為Diazepam三種主要代謝產物活躍活體內，所以藥物動力學的研究是必要的。這項研究宗旨將減少分析的期間，在他們的治療範圍時為了維持這些化合物的偵測和靈敏度是必要的

實驗步驟： 1.需要Temazepam and N-desmethyldiazepam 和將標準的diazepam, oxazepam and alperazolam 當作internal standard (IS)

2.Acetonitrile and methanol 使用HPLC等級和phosphoric acid (85%)使用分析等級

3.Mobile phase 10mmol/L phosphate buffer (pH2.5)–methanol–acetonitrile (63:10:27,v/v) 且流速設為2mL/min

4.Diazepam, oxazepam and alprazolam 以1mg/mL的濃度分別溶在甲醇中，所有化合物中間產物準備了10μg/mL使用流動相作為溶劑

5.0.5mL的plasma + 50μL alprazolam 當作internal standard (1μg/mL) 以1.5mL toluene萃取

6.然後vortex 5分鐘，離心2分鐘，取上清液並且吹乾

7.乾的萃取物以150μL mobile phase 溶解並取100μL的溶液去注射HPLC

8.buffer的濃度最好在10 and 50mmol/L之間

討論： 1.PH值的影響：對於OX, TZ and ALP PH值沒有太大的影響，而對DZ and NDZ 而言PH值有很大的影響，本實驗較佳的PH值是2.5 2.動相中acetonitrile的百分比：acetonitrile的百分比由25變到32%，總體的運行時間由12分鐘減至5分鐘 3.動相中methanol的百分比：methanol的百分比以10%有較佳的解析度

結論： 這項研究的目標將開發一個有選擇性的方法為Diazepam和它的代謝產物在人的血漿中。設計迅速，有選擇性，可再生和容易執行的方法，這個方法的主要好處是對簡單的液液萃取的用途作為色譜分析的做法，與早先出版論文比較有更短的運行時間和更好的敏感性，總而言之，此中被提出的方法也許為藥物動力學的研究充分地被推薦以及治療藥物監視。