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	此方法回收率、精準度、穩定性都很高，但是就是分離時間過長，以及實驗步驟太過冗長、是非常需要好好的改善以及具有繼續研究的價值。		此方法回收率、精準度、穩定性都很高，但是就是分離時間過長，以及實驗步驟太過冗長、是非常需要好好的改善以及具有繼續研究的價值。
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	Diazepam是benzodiazepine的一種，一般使用作為安眠藥、抗焦慮藥和肌肉鬆弛劑，化學式C16H13ClN2O，可口服、靜脈注射、肌肉注射、或以栓劑方式給藥，在口服後，迅速被身體吸收，藥效很快開始，以靜脈注射或肌肉注射方式給藥的話，藥效更快。		Diazepam是benzodiazepine的一種，一般使用作為安眠藥、抗焦慮藥和肌肉鬆弛劑，化學式C16H13ClN2O，可口服、靜脈注射、肌肉注射、或以栓劑方式給藥，在口服後，迅速被身體吸收，藥效很快開始，以靜脈注射或肌肉注射方式給藥的話，藥效更快。
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-	====3.Racecadotril metabolite thiorphan in human plasma using solid-phase extraction(SPE)====	+	====3.人體血漿中的Racecadotril metabolite thiorphan====
	=====Racecadotril=====		=====Racecadotril=====
	是一種enkephalinase的抑制劑，口服Racecadotril後會水解反應成更有效的enkephalinase的抑制劑–Thiorphan。目前沒有HPLC的分析方法可以測人體血漿內的Thiorphan。只有一些是用於老鼠身上做檢測的HPLC方法，但不適用於人體其靈敏度也不夠，而LC/MS/MS detection由於太昂貴也不適用於臨床上，本篇paper是為了研發一種有效的採用UV偵測 HPLC的方法。		是一種enkephalinase的抑制劑，口服Racecadotril後會水解反應成更有效的enkephalinase的抑制劑–Thiorphan。目前沒有HPLC的分析方法可以測人體血漿內的Thiorphan。只有一些是用於老鼠身上做檢測的HPLC方法，但不適用於人體其靈敏度也不夠，而LC/MS/MS detection由於太昂貴也不適用於臨床上，本篇paper是為了研發一種有效的採用UV偵測 HPLC的方法。

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當前修訂版本

目錄 1 藥物分析讀書會 1.1 主題: 1.1.1 1.兔子血漿中的Ranitidine(RAN) 1.1.1.1 CYP： 1.1.2 2.人體血漿中的Diazepam與其代謝物 1.1.2.1 實驗步驟： 1.1.2.2 討論： 1.1.2.3 結論： 1.1.3 3.人體血漿中的Racecadotril metabolite thiorphan 1.1.3.1 Racecadotril 1.1.3.2 實驗過程 1.1.3.3 結論: 1.1.4 4.天然藥草的藥用性 1.1.4.1 引言： 1.1.4.2 實驗流程: 1.1.4.3 結論:

[編輯] 藥物分析讀書會

[編輯] 主題:

利用層析儀探討

1.兔子血漿中的ranitidine(RAN)

2.人體血漿中的Diazepam與其代謝物

3.人體血漿中的Racecadotril metabolite thiorphan

4.天然藥草的藥用性

[編輯] 1.兔子血漿中的Ranitidine(RAN)

Ranitide是一種抗胃酸的藥，主要是抑制胃壁細胞中所分泌H2-受體的抑制劑。同時此類藥物並不會抑制肝中Cytochrome P450酵素，因為它的同類藥物Cimetidine會抑制肝中CYP450，而使得產生毒素。療效：十二指腸潰瘍

[編輯] CYP：

在人體內會與藥物代謝關係最密切的一群酵素，Cytochrome P450系統(CYP 450)。CYP 450酵素主要分佈在肝臟及小腸壁。其扮演的角色就是負責許多藥物、致癌物、食品添加物、環境污染物的代謝反應。也就是說酵素過多或許藥效就因此減弱(因有效成分被過度代謝掉，而排出體外); 反之如果酵素過低, 甚至缺乏則有可能毒性增加(因為藥物血中濃度過高)。所以任何會影響這個代謝酵素系統的藥物或食物即會影響經由此系統代謝的藥物，就是所謂的交互作用。所以沒有所謂的酵素較少就較好。

此次實驗主要是利用dansyl chloride衍生，因為它會和RAN的氨基產生反應，產生adducts。同時我們也很常看到dansyl chloride用在生化方面胺基酸的定序等等。

而我們要做的就是利用液液萃取方式抽出我們想要的東西。並且把偵測器設定在我們想要的波長。接著開始於血漿加入1M NaOH，用diethyl ether 萃取之。然而這個實驗的IS為Ephedrine HCl (EPH-HCl) 。RAN和EPH衍生後，接著在PH9.5的sodium bicarbonate 溶液中加熱至60度達10分鐘。此溶液的移動相為百分之48的acetonitrile和百分之52的sodium acetate solution (0.02 M, pH 4.6)

此實驗的濃度範圍：0.025-10μg/ml 回收率：97.5±1.1%

此方法回收率、精準度、穩定性都很高，但是就是分離時間過長，以及實驗步驟太過冗長、是非常需要好好的改善以及具有繼續研究的價值。

[編輯] 2.人體血漿中的Diazepam與其代謝物

Diazepam是benzodiazepine的一種，一般使用作為安眠藥、抗焦慮藥和肌肉鬆弛劑，化學式C16H13ClN2O，可口服、靜脈注射、肌肉注射、或以栓劑方式給藥，在口服後，迅速被身體吸收，藥效很快開始，以靜脈注射或肌肉注射方式給藥的話，藥效更快。

三種主要活躍代謝產物N-desmethyldiazepam or nordiazepam(NDZ), oxazepam (OX) and temazepam (TZ)，由肝臟cytochrome P450s代謝，因為Diazepam三種主要代謝產物活躍活體內，所以藥物動力學的研究是必要的。這項研究宗旨將減少分析的期間，在他們的治療範圍時為了維持這些化合物的偵測和靈敏度是必要的

[編輯] 實驗步驟：

1.需要Temazepam and N-desmethyldiazepam 和將標準的diazepam, oxazepam and alperazolam 當作internal standard (IS)

2.Acetonitrile and methanol 使用HPLC等級和phosphoric acid (85%)使用分析等級

3.Mobile phase 10mmol/L phosphate buffer (pH2.5)–methanol–acetonitrile (63:10:27,v/v) 且流速設為2mL/min

4.Diazepam, oxazepam and alprazolam 以1mg/mL的濃度分別溶在甲醇中，所有化合物中間產物準備了10μg/mL使用流動相作為溶劑

5.0.5mL的plasma + 50μL alprazolam 當作internal standard (1μg/mL) 以1.5mL toluene萃取

6.然後vortex 5分鐘，離心2分鐘，取上清液並且吹乾

7.乾的萃取物以150μL mobile phase 溶解並取100μL的溶液去注射HPLC

8.buffer的濃度最好在10 and 50mmol/L之間

[編輯] 討論：

1.PH值的影響：對於OX, TZ and ALP PH值沒有太大的影響，而對DZ and NDZ 而言PH值有很大的影響，本實驗較佳的PH值是2.5 2.動相中acetonitrile的百分比：acetonitrile的百分比由25變到32%，總體的運行時間由12分鐘減至5分鐘 3.動相中methanol的百分比：methanol的百分比以10%有較佳的解析度

[編輯] 結論：

這項研究的目標將開發一個有選擇性的方法為Diazepam和它的代謝產物在人的血漿中。設計迅速，有選擇性，可再生和容易執行的方法，這個方法的主要好處是對簡單的液液萃取的用途作為色譜分析的做法，與早先出版論文比較有更短的運行時間和更好的敏感性，總而言之，此中被提出的方法也許為藥物動力學的研究充分地被推薦以及治療藥物監視。

[編輯] 3.人體血漿中的Racecadotril metabolite thiorphan

[編輯] Racecadotril

是一種enkephalinase的抑制劑，口服Racecadotril後會水解反應成更有效的enkephalinase的抑制劑–Thiorphan。目前沒有HPLC的分析方法可以測人體血漿內的Thiorphan。只有一些是用於老鼠身上做檢測的HPLC方法，但不適用於人體其靈敏度也不夠，而LC/MS/MS detection由於太昂貴也不適用於臨床上，本篇paper是為了研發一種有效的採用UV偵測 HPLC的方法。

[編輯] 實驗過程

所有血漿樣品都以solid-phase extraction cartridges(固相微萃取)處裡

(1)100μl 0.2M phosphate buffer(pH = 2.0) + 100μL IS(4μg/mL) 一起加入到500μL血漿樣品然後vortex-mixed for 3 min

(2)將混合物一起流入固相管柱中

(3)先以1ml 0.2M phosphate buffer(pH = 2.4)清洗，再用ACN將分析物流析出來並收集

(4)流析出來的分析物在40◦C下用氮氣吹乾

(5)接著用100μL動相回溶，然後注入20μ到層析儀

[編輯] 結論:

HPLC–UV的方法對於檢測人體血漿中thiorphan很有效，比較於之前的HPLC方法，HPLC–UV有較高的靈敏度、較好的萃取回收率和較廣的線性濃度，也許LC/MS/MS的方法更為靈敏，但此法不需要像LC/MS/MS所用的儀器如此昂貴，所以更能方便提供於臨床上的研究

[編輯] 4.天然藥草的藥用性

[編輯] 引言：

在生活週遭有著許許多多的花草樹木，其中有些植物的代謝產物是具有療效，這次的報告主題是針對Cedrus deodara（雪松）作藥物動力學的研究。雪松在古早印度時，就已經被廣泛地使用在治療上，根據現代的科技也證明該植物體內確實有多種天然化合物含有特殊藥性，而這篇報告主要針對wikstromol、matairesinol以及dibenzylbutyrolactol三種化合物，並研究其對於實驗老鼠的藥物動力學實驗。

[編輯] 實驗流程:

實驗中，wikstromol、matairesinol以及dibenzylbutyrolactol三種化合物以一定的比例可以在細胞中產生些許毒素，並且對於癌細胞的不正常增生有減緩的趨勢。 利用HPLC以及PDA-UV等儀器，檢測不同時間抽取的老鼠血漿並藉由SPE萃取方法獲得老鼠體內不同時間的代謝藥物含量，time interval of 0.083, 0.167, 0.25, 0.5, 1, 2, 4, 8, 12, 16, 24 h，接著利用HPLC將三種藥物分離並以偵測器取得其不同時間的藥物含量，再利用計算藥物動力學的試算軟體計算出三種藥物的不同藥理性質以及代謝情況等。

[編輯] 結論:

針對這次實驗來說，天然物中的有機化合物分離其實已經法展到有一定的水平，但是天然植物中的化合物含量還是極為少量，所以實驗上才會使用HPLC儀器作為分離方法，可以在少量的藥品中取得極為精確的數據，其取的的數據對於藥物的代謝上才是為重要的數值，接著證明化學物具有一定療效之後，接著就是化合物的實驗室開發合成方法，畢竟一棵樹木中，其有藥效的化合物含量真的很少。