期刊論壇(一)讀書會
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在2009年4月27日 (一) 00:24所做的修訂版本
緣起
這是一個"期刊論壇的讀書會"主要是針對目前生物期刊發行種類多樣且數量也龐大，憑一己之力量所能閱讀的文章有限，而自己獨自一人對於文章內容的解讀上也易產生迷思，因此想藉由多人閱讀生物期刊，且每人所喜好的主題有所差異下，而能達到短時間就能有多元化的知識刺激，而且這樣開放性的討論空間，讓在場的眾人提供自己的背景知識及腦力激盪，總能再延伸更多的想法與問題，這是個能讓對科學研究有興趣的人感到十分exciting。
內容
另外基於尊重著作權，所以下面所提到的期刊文章內容的圖表部分並沒有附上，但是文章都是高醫圖書館都有提供的期刊，請有興趣的人可按照所附的資訊去做檢索，謝謝。
''((A))''
Title Efficacies of inactivated vaccines against betanodavirus in grouper larvae (Epinephelus coioides) by bath immunization
Authors Yu-Hsuan Kai, Shau-Chi Chi
Source Vaccine (2008) 26, 1450—1457
Why do? 病毒性神經壞死症病毒(Viral nervous necrosi virus, NNV)是種能感染大於34種養殖魚(含海水及淡水魚)，並會造成魚苗高致死率達80-100%。現今在NNV vaccine的免疫方式是以肌肉內注射(intramuscular, IM)或腹腔內注射(intraperitoneal, IP)兩種方式為主，這容易造成魚苗壓力及耗人力，所以開發非注射型免疫方式是作者的目標。另外，石斑魚是台灣在內需或外銷上很重要的高經濟價值魚苗。
How do? 利用formalin或binary ethylenimine(BEI)處理NNV，得到失活化病毒疫苗在不同的實驗設計(請見期刊中的Fig. 1)下去免疫魚苗，並對免疫過的魚苗進行攻毒測試看看失活化病毒疫苗的功效如何。
Result (1) 每組100隻石斑魚苗(體重 0.2g；身長 2.4cm)以不同處理但病毒量相同(107 TCID50/ml)的失活化病毒溶液(0.1% formalin (F-I)、0.2% formalin (F-II) 和 4mM BEI)浸潤魚隻120分鐘後，並在免疫後30天對魚隻進行攻毒。結果顯示，用BEI處理的失活化病毒疫苗相較於formalin處理的失活化病毒疫苗有較低的累積死亡率，並且在統計分析上有顯著性的差異(請見期刊中的Fig. 2)。 (2) 另外作者引入奈米包膜技術，將失活化病毒疫苗包膜化後去免疫魚苗。結果發現包膜可以改善formalin處理的失活化病毒疫苗的免疫效果，降低魚苗攻毒時的累積死亡率，並且在統計分析上有顯著性的差異(請見期刊中的Fig. 5)。 (3) 魚隻經由BEI處理的失活化病毒疫苗免疫後15、30、90天，再以浸泡(bath)或肌肉內注射 (IM)的方式進行攻毒測試。可看出以失活化病毒疫苗免疫後15天的組別相較於30天或90天的組別累積死亡率偏高(43% VS 13%, 10%)，且相對存活百分率(relative percent survival, RPS)偏低(30 VS 87, 82)，這意指15天還不足以讓幼魚發展出完整的免疫能力去抵抗NNV的感染。不過以IM的攻毒方式在90天的組別RPS也降低到8。
Conclusion (1) 雖然臭氧可以用來消毒受精卵以達到控制VNN的感染，但其安全劑量隨物種的改變而有所不同，因此在實際的應用上仍有困難。目前，為有效控制魚病毒感染，免疫法還是較能夠被廣泛接受。此篇paper將浸泡免疫法(bath immunization)應用於40 dph (days post-hatch)石斑魚上，此時期的魚形態雖小但其免疫器官已發展完成。 (2) 大部分魚疫苗是靠傳統的方法藉由複雜的純化步驟才可得到，而此方法只需直接從受NNV感染的GF-1細胞的上清液獲得即可。 (3) 大部分的魚疫苗製備其失活性的抗原是藉由formalin，但近年來，BEI在應用上因其不會與蛋白質反應的被認為更優於formalin，在此篇paper中也同樣證實了利用BEI去活化NNV引起免疫效果的能力優於formalin。 (4) 在此篇paper，又應用了另一種新技術，將NNV疫苗奈米包膜化。將NNV疫苗與氫化植物油和其他元素混合處理產生奈米包膜顆粒。因氫化植物油的排水和排氧的特性可增加疫苗的穩定性以保存疫苗，此包膜化疫苗的高穩定性使得此疫苗可藉由魚的體表或躲過胃酸的破壞而由消化道進入魚體內。 (5) 相較於之前的paper，betanodavirus皆被測試於青年或成年時期的魚，而此篇paper還指出利用BEI失活性病毒疫苗即可在魚晚幼年時期及早青年時期大量減少其死亡。
Discussion (1) 為什麼以浸潤的免疫方式能達到免疫的效果？ a. 可能是失活化病毒疫苗透過水的媒介，經由魚的黏膜或是食道甚至是鰓等途徑來造成免疫效果。 b. 如：成大 楊惠郎教授藉由表現GNNV鞘蛋白的E. coli餵食豐年蝦，之後再將豐年蝦餵給石斑魚苗吃，即可達到免疫魚隻的效果。台大 陳秀男教授利用NNV死毒疫免免疫雞隻，雞會生產具有抗NNV抗體的雞蛋，而這樣的雞蛋餵食魚苗亦可達到功效。因此，透過魚隻進食疫苗而產生免疫能力是種可參考的免疫方式。 c. 另外魚隻能由進食而有免疫能力或許並不是魚隻本身自己產生的，而是其消化道內的細菌會分泌抗病毒物質，Yoshimizu (2003)在魚隻消化道內分離到具有可中和BFNNV的細菌株，細菌單株化培養後加入魚飼料中餵食也可達到防疫的效果。
